NAJNOWSZE I NAJPOPULARNIEJSZE FILMY
Musisz to wiedzieć (1217) Nie ważne czy byli u Mazurka. Ważne, że nie było ich na sali sejmowej
Posted on 25 września 2021 by bZIK
264 views
Nilu Prawie Nie Widać. Jak Ogromna Tama W Etiopii Wywołała Gigantyczny Problem
Posted on 25 września 2021 by bZIK
21 views
Wyciekły BADANIA o W̲I̲R̲U̲S̲I̲E̲! Podano datę KOŃCA P̲A̲N̲D̲E̲M̲I̲I̲ | WIADOMOŚCI
Posted on 25 września 2021 by bZIK
30 views
Bomba Parowa – Wybuchy Kotłów, Parowozy I Parowce
Posted on 25 września 2021 by bZIK
15 views
7 wczesnych objawów chorych nerek – większość z nich bagatelizujesz.
Posted on 25 września 2021 by bZIK
55 views
Jak usunąć skutki działania ”szczypawek” – Jan Taratajcio
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
1105 views
RATEL – Kuloodporny, Nieśmiertelny i Nieustraszony Zwierz
Posted on 24 września 2021 by bZIK
54 views
N̳i̳e̳z̳a̳s̳z̳c̳z̳e̳p̳i̳e̳n̳i̳ pracownicy NIE dostaną PIENIĘDZY | WIADOMOŚCI
Posted on 24 września 2021 by bZIK
37 views
Tunel schronowy Adolfa Hitlera na Podkarpaciu. Mieścił się w nim pociąg wodza III Rzeszy
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
227 views
Elbanowska: „Zdalne nauczanie cofnęło dzieci w rozwoju intelektualnym”
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
35 views
Już Nie 40% a 250% Podwyżki Cen Prądu Gazu Paliwa! Rząd Zbuduje Mentalną Zgodę Na To – Analiza Ator
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
34 views
W starym kinie –  Książątko (1937)
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
19 views
Prąd podrożeje nawet o 40%! Kampania społeczna wytłumaczy Polakom skąd podwyżki
Posted on 24 września 2021 by Enigma2021
27 views
3-etapowy trening na zbudowanie mięśni brzucha w mniej niż 30 dni
Posted on 24 września 2021 by bZIK
220 views
11 nieznanych korzyści probiotyki
Posted on 24 września 2021 by bZIK
23 views
Teatr dla G… To Już Fakt! Urodziny Mazurka i Topowi Politycy Imprezują – Analiza Komentator RMF FM
Posted on 23 września 2021 by Enigma2021
703 views
Realizują Nie Swój Plan? Tylko Czyj? – Jasnowidz Jackowski i Ator Przepowiednie Analiza Finanse Bank
Posted on 23 września 2021 by Enigma2021
50 views
7 sygnałów zbliżającego się zawału serca
Posted on 23 września 2021 by bZIK
985 views
Ogromne Złoża Pierwiastków I Metali Szlachetnych Odkryte W Afganistanie
Posted on 23 września 2021 by bZIK
70 views
Jahwe i Limit 120 Lat – Długowieczność Starożytnych Ludzi
Posted on 23 września 2021 by bZIK
48 views
Braunowi grozi 3 LATA W̾I̾Ę̾Z̾I̾E̾N̾I̾A! „Ukrywa swój majątek” | WIADOMOŚCI
Posted on 23 września 2021 by bZIK
39 views
Musisz to wiedzieć (1215) To nie banda pięciorga, to po prostu „koledzy z pracy”
Posted on 23 września 2021 by Ewa.x
1228 views
Luka na GRANICY! I̾m̾i̾g̾r̾a̾n̾c̾i̾ przechodzą do POLSKI | WIADOMOŚCI
Posted on 22 września 2021 by bZIK
348 views
Rosja ćwiczy A̲T̲A̲K̲ N̲U̲K̲L̲E̲A̲R̲N̲Y̲ na Polskę! Mają nas na MUSZCE | WIADOMOŚCI
Posted on 22 września 2021 by bZIK
1235 views
Eksplozja Tej Gigantycznej Gwiazdy Będzie Widoczna Z Ziemi W 2022 Roku. Czy Uda Nam Się Przetrwać?
Posted on 22 września 2021 by bZIK
86 views
Najgorsi Rodzice W Świecie Zwierząt
Posted on 22 września 2021 by bZIK
69 views
Musisz to wiedzieć (1215) Skarbówka, gdyby chciała mogłaby go „zgnieść jak robaka”
Posted on 22 września 2021 by bZIK
102 views
W starym kinie – Zapomniana Melodia (1938)
Posted on 22 września 2021 by Enigma2021
79 views
3 Dawka Zatwierdzona w Polsce! Analiza Konferencji Premiera i v-ce Ministra Zdrowia! Ator Komentator
Posted on 22 września 2021 by Enigma2021
60 views
Norymberga – Nazisci wobec swoich zbrodni cz.2 Mroczne fakty FILM DOKUMENTALNY PL
Posted on 22 września 2021 by Enigma2021
51 views
Norymberga – Nazisci wobec swoich zbrodni cz.1 Spisek nazistów FILM DOKUMENTALNY PL
Posted on 22 września 2021 by Enigma2021
48 views
KAŻDY KTO TAK ZROBI TO URATUJE SIĘ OD SKUTKÓW – JEZUS – Podaję instrukcję i WAŻNE INFORMACJE
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
1238 views
Tajemnicze przedmioty, których nie potrafi wyjaśnić nauka
Posted on 21 września 2021 by Wenus
491 views
Co znajduje się POD POWIERZCHNIĄ POLSKI?”
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
528 views
„Vaccine is Full of Shit”
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
169 views
„POKAZUJĘ PRAWDĘ CO SIĘ STANIE JAK TO PRZYJMIESZ…”
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
307 views
W starym kinie Czy Lucyna to dziewczyna 1934
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
104 views
Chiny i Rosja ćwiczenia wojskowe
Posted on 21 września 2021 by bZIK
290 views
Hiszpania: Zdjęcia lawy w La palma
Posted on 21 września 2021 by bZIK
178 views
Musisz to wiedzieć (1214) Jakby nie patrzeć, to ta krytyka i tak jest na korzyść PiS
Posted on 21 września 2021 by bZIK
66 views
Źle leczysz cukrzycę – sprawdź co musisz zmienić.
Posted on 21 września 2021 by bZIK
67 views
Nowy Podstęp PIS? Do 8 Lat Więzienia za Zarażenie Kogoś „Koronką”
Posted on 21 września 2021 by Enigma2021
198 views
Podsstępy plemienia żmijowego.-WIEDZIEĆ WIĘCEJ ODCINEK 47
Posted on 21 września 2021 by Wenus
290 views
Moc Pańskiego Ziela.Wzmianki o Pańskim zielu  pochodzą z około 1500 roku przed naszą erą.
Posted on 21 września 2021 by Wenus
122 views
Elektryczne sterowce Tesli…czy podróżnicy „znikąd”?
Posted on 20 września 2021 by Marta Autor
427 views
To Się Nie Mieści W Głowie! Nowy Polski Ład Robi PRZESTĘPCÓW z Ludzi Chcących Mieć DOM! Ator Analiza
Posted on 20 września 2021 by Enigma2021
351 views
Demon ma sposób na każdego z nas | ks. Grzegorz Śniadoch
Posted on 20 września 2021 by Enigma2021
112 views
Znasz Klausa Schwaba i Billa Gatesa? Poznaj sir Ronalda Cohena!
Posted on 20 września 2021 by Enigma2021
110 views
Znamię bestii, ogon skorpiona, wino nierządnicy – czy już tu są?
Posted on 20 września 2021 by Enigma2021
146 views
M. Morawiecki i K. Morawiecki – mocodawcy Olszańskiego.!!!
Posted on 20 września 2021 by Enigma2021
128 views
POLITYKA STRONY M-FORUM !!! - WSZYSTKIE ZAMIESZCZANE MATERIAŁY ORAZ PREZENTOWANE I PROPAGOWANE - Poglądy i opinie zawarte w artykułach mogą być niezgodne ze stanowiskiem redakcji. !!!! REDAKCJA M-FORUM AV LIVE MA NA CELU PUBLIKOWANIE WSZYSTKICH INFORMACJI KTÓRE SĄ CENZUROWANE BEZ WZGLĘDU NA ZABARWIENIA POLITYCZNE , RELIGIJNE I OBYCZAJOWE - ZA KOMENTARZE I WYPOWIEDZI CZYTELNIKÓW I WIDZÓW NIE BIERZE ODPOWIEDZIALNOŚCI , Z WYJĄTKIEM TREŚCI O CHARAKTERZE PRZESTĘPCZYM KTÓRE BĘDĄ USUWANE BEZ OSTRZEŻEŃ     UWAGA !! WAŻNE - Poglądy i opinie zawarte w artykule mogą być niezgodne ze stanowiskiem redakcji. Zamieszczane artykułu są w wiekszości re- publikacjami materiałów z innych stron - REDAKCJA NIE INGERUJE W ICH TREŚCI W CELU ZACHOWANIA BEZSTRONNOŚCI , A CELEM PUBLIKACJI JEST PODDANIE TYCH MATERIAŁÓW POD OSĄD I KRYTYKĘ CZYTELNIKÓW W KTÓRE OPINIE NIE MOŻE INGEROWAĆ AUTOR MATERIAŁU W FORMIE MODERACJI LUB CENZURY

M-forum A.V Live.

TO PORTAL NA KTÓRYM CODZIENNIE ZNAJDZIESZ PONAD 100 INFORMACJI INFO NIUS W TYM MATERIAŁY CENZUROWANE LUB ZABRONIONE NA INNYCH PORTALACH POPRAWNYCH POOLITYCZNIE

CZERWONE

Są to silne działanie przeciwwirusowe nanocząstek srebra na SARS-CoV-2

0.00 avg. rating (0% score) - 0 votes

Logo of pheelsevier

Biochem Biophys Res Commun. 26 listopada 2020 r.; 533 (1): 195-200.
Opublikowano online 11 września 2020 r. doi: 10.1016/j.bbrc.2020.09.18
PMCID: PMC7486059
PMID: 32958250
Silne działanie przeciwwirusowe nanocząstek srebra na SARS-CoV-2
Sundararaj S. Jeremiah Kei Miyakawa Takeshi Morita Yutaro Yamaoka,a,b and Akihide Ryoa,

Powiązane dane

Supplementary Materials

Abstrakcyjny

Pandemia COVID-19 rozprzestrzenia się bez kontroli z powodu braku skutecznych środków przeciwwirusowych. Nanocząstki srebra (AgNP) zostały zbadane pod kątem właściwości przeciwwirusowych i przypuszczalnie hamują SARS-CoV-2. Ze względu na zapotrzebowanie na skuteczny środek przeciwko SARS-CoV-2, oceniliśmy działanie przeciwwirusowe AgNPs. Oceniliśmy mnóstwo AgNP o różnych rozmiarach i stężeniu i zaobserwowaliśmy, że cząstki o średnicy około 10 nm skutecznie hamowały zewnątrzkomórkowe SARS-CoV-2 w stężeniach w zakresie od 1 do 10 ppm, podczas gdy efekt cytotoksyczny zaobserwowano przy stężeniach 20 ppm i wyższych . Test wnikania pseudowirusa oparty na lucyferazie ujawnił, że AgNPs silnie hamują etap wnikania wirusa poprzez zakłócanie integralności wirusa. Wyniki te wskazują, że AgNPs są bardzo silnymi mikrobicydami przeciwko SARS-CoV-2, ale należy je stosować ostrożnie ze względu na ich działanie cytotoksyczne i ich potencjał do zakłócania ekosystemów środowiskowych w przypadku niewłaściwej utylizacji.

Słowa kluczowe: Nanocząstki srebra, srebro koloidalne, SARS-CoV-2, COVID-19
Iść do:
1. Wstęp

Metal pierwiastkowy, srebro (Ag), ma szerokie spektrum działania przeciwdrobnoustrojowego przeciwko różnym bakteriom, grzybom i wirusom. Ze względu na swoją wszechstronność nanocząstki Ag (AgNP) znalazły obecnie zastosowanie jako środek bakteriobójczy do powierzchni biologicznych w różnych postaciach, takich jak opatrunki na rany, wyroby medyczne, dezodoranty w sprayu i tkaniny. Kilka badań wykazało silne działanie przeciwwirusowe AgNPs przeciwko różnym ludzkim wirusom chorobotwórczym, takim jak syncytialny wirus oddechowy (RSV), wirus grypy, Norowirus, wirus zapalenia wątroby typu B (HBV) i ludzki wirus niedoboru odporności (HIV) [1]. Oprócz tych wirusów, ponieważ wykazano, że Ag zabija SARS-CoV, postawiliśmy hipotezę, że AgNPs mogą hamować SARS-CoV-2 [2,3]. Do tej pory nie ma badań bezpośrednio wykazujących wpływ AgNPs na SARS-CoV-2. Przetestowaliśmy srebro koloidalne (cAg), zwykłe nanocząsteczki Ag o różnych średnicach (AgNPn) i 10 nm nanocząsteczki srebra pokryte poliwinylopirolidonem (PVP-AgNP10) przeciwko SARS-CoV-2, aby znaleźć najbardziej efektywny rozmiar i stężenie Ag, które może hamować SARS -CoV-2. Proponujemy, aby AgNPs można było stosować na powierzchniach nieożywionych i niebiologicznych, aby skutecznie kontrolować trwającą pandemię COVID-19, jednocześnie dbając o to, aby jej nie nadużywać.

Iść do:
2. Materiały i metody
2.1. Hodowla komórkowa i namnażanie wirusa

VeroE6/TMPRSS2 (komórki VeroE6 stabilnie eksprymujące transbłonową proteazę serynową TMPRSS2, JCRB #1819) i linie komórkowe Calu-3 hodowano w DMEM zawierającym 10% FBS [4]. SARS-CoV-2 (JPN/TY/WK-521) otrzymano z NIID, JAPONIA, przechowywano w porcjach w temperaturze –80 °C i stosowano na poziomie bezpieczeństwa biologicznego 3 (BSL3). Podczas wykonywania badań infekcji SARS-CoV-2 zastosowano DMEM zawierający 2% FBS.

2.2. Test płytki nazębnej

Test łysinkowy przeprowadzono SARS-CoV-2 na liniach komórkowych VeroE6/TMPRSS2 i Calu-3, jak opisano w innym miejscu, z niewielkimi modyfikacjami [5]. 96-dołkowe płytki wysiano z 5 × 104 komórek na dołek w 10% FBS/DMEM i pozostawiono do wzrostu przez noc. Roztwór wirusa rozcieńczono w 10-krotnych seryjnych rozcieńczeniach w 2% FBS/DMEM. Supernatanty ze studzienek usunięto i zastąpiono rozcieńczeniami wirusa w odpowiednio oznakowanych studzienkach i inkubowano w 37°C przez 96 godzin, po czym komórki utrwalono 4% formaliną i wybarwiono 0,25% fioletem krystalicznym w celu uwidocznienia łysinek na białym tle. Medianę dawki zakażającej hodowlę tkankową (TCID50) i krotność zakażenia (MOI) obliczono z czterokrotnych testów.

2.3. Preparaty srebra

PVP-AgNP10 w stężeniu zapasu 20 ppm (nr kat: 795925) i cAg (nr kat: 85131) uzyskano z Sigma. AgNP o różnych rozmiarach; AgNP2 (nr kat: US7150), AgNP15 (nr kat: US7091), AgNP50, AgNP80 i AgNP100 (US1038W) zakupiono od US Research Nanomaterials, Inc. Wszystkie preparaty srebra zdyspergowano w wodzie, a pożądane stężenie przygotowano przez rozcieńczenie w sterylnej wodzie destylowanej.

2.4. Test żywotności komórek

Test CellTiter-Glo Cell Viability Assay (Promega) to test oparty na luminescencji, który ilościowo wykrywa żywe komórki na podstawie poziomu adenozynotrifosforanu (ATP). Śmierć komórek w następstwie cytotoksyczności pośredniczonej przez Ag lub infekcji wirusowej można szybko określić ilościowo za pomocą Cell-Titer Glo [6]. Do komórek dodano 50 μl substratu CellTiter-Glo (Promega) i zmierzono ich żywotność na podstawie intensywności luminescencji wykrytych przez GloMax Discover System (Promega) 10 minut później.

2.5. RT-qPCR

Wirusowe RNA wyekstrahowano z supernatantów hodowli przy użyciu zestawu QIAamp virus RNA Mini Kit (Qiagen) i przechowywano w temperaturze –80 °C do dalszej analizy. Wyekstrahowane wirusowe RNA oznaczono ilościowo przy użyciu CFX96 Real-Time System (Bio-rad) z jednoetapową mieszanką główną wirusa TaqMan Fast (Thermo) z użyciem 5′-AAATTTTGGGGACCAGGAAC-3′ i 5′-TGGCAGCTGTGTAGGTCAA-3′ jako zestawu starterów oraz 5′-FAM-ATGTCGCGCATTGGCATGGA-BHQ-3′ jako sonda [7].

2.6. Badania cytotoksyczności

cAg lub AgNPs w pożądanym stężeniu dodano do linii komórkowych VeroE6/TMPRSS2 lub Calu-3 hodowanych w 96-dołkowych białych płytkach i inkubowano w 37°C odpowiednio przez 48 lub 96 godz., po czym komórki przemyto PBS, a żywotność była oznaczano ilościowo za pomocą testu CellTiter-Glo.

Iść do:
3. Badania srebra i interakcji SARS-CoV-2
3.1. Test wstępnej obróbki wirusa

Wirus przy MOI 0,05 (dla VeroE6/TMPRSS2) lub 0,5 (dla Calu-3) w DMEM zawierającym 2% FBS inkubowano z 2 ppm roztworem AgNP przez 1 godzinę w 37°C. Odpowiednią mieszaninę wirus-AgNP dodano do komórek VeroE6/TMPRSS2 lub Calu-3 w 96-studzienkowych płytkach i inkubowano odpowiednio przez 48 godz. lub 96 godz. w 37°C. Żywotność komórek określano ilościowo za pomocą testu CellTiter-Glo, a kopie wirusa w supernatancie określano ilościowo za pomocą RT-qPCR.

3.2. Test komórek po obróbce

Komórki VeroE6/TMPRSS2 zakażono SARS-CoV-2 (MOI = 0,05) i inkubowano przez 2 godz. w 37°C. Studzienki przemyto PBS w celu usunięcia wirusów zewnątrzkomórkowych i uzupełniono DMEM zawierającym 2% FBS z 2 ppm PVP-AgNP10 i inkubowano przez 48 godzin w 37°C. Żywotność komórek określano ilościowo za pomocą testu CellTiter-Glo, a kopie wirusa w supernatancie określano ilościowo za pomocą RT-qPCR.

3.3. Test wstępnej obróbki komórek

Komórki VeroE6/TMPRSS2 traktowano 2 ppm PVP-AgNP10 i inkubowano przez 3 godziny w 37°C. Studzienki następnie przemyto PBS w celu usunięcia wolnych AgNPs w pożywce i uzupełniono DMEM zawierającym 2% FBS z SARS-CoV-2 (MOI = 0,05) i inkubowano przez 48 godzin w 37°C. Żywotność komórek określano ilościowo za pomocą testu CellTiter-Glo, a kopie wirusa w supernatancie określano ilościowo za pomocą RT-qPCR.

3.4. Immunofluorescencja

Komórki utrwalono 4% paraformaldehydem i permeabilizowano 0,5% Triton X-100, a następnie zablokowano Blocking One (Nacalai) w temperaturze pokojowej przez 15 min. Komórki inkubowano z przeciwciałem poliklonalnym przeciwko przeciwciału SARS-CoV-2 białko nukleokapsydu (rozcieńczenie 1:100, Novus NB100-56576) w temperaturze pokojowej przez 1 godz. Po inkubacji komórki barwiono przeciwciałem przeciwkróliczym znakowanym Alexa 568 (rozcieńczenie 1:1000, Thermo) przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Jądro wybarwiono ProLong Gold Antifade Mountant z DAPI (Thermo). Zdjęcia wykonano mikroskopem fluorescencyjnym BZ-9000 (Keyence).

3.5. Test wejścia pseudowirusa

Pseudotyp lentiwirusa wytworzono przez przejściową transfekcję komórek HEK293 pNL4-3. Luc.R-E- i pSARS2-Spike-FLAG w stosunku 1:1. Supernatanty hodowli zawierające pseudowirusy zebrano 48 godzin po transfekcji i przefiltrowano przez filtr 0,45 μm Millex-HV (Merck). Do testu wejściowego komórki VeroE6/TMPRSS2 wysiane na 96-studzienkowych płytkach przemyto i zaszczepiono 100 μl pożywki zawierającej pseudowirusa z lub bez PVP-AgNP10. Jako kontrolę hamowania wejścia zastosowano przeciwciało neutralizujące. 48 godzin po zaszczepieniu komórki przemyto i dodano 40 μl substratu Bright-Glo (Promega). Aktywność lucyferazy mierzy się za pomocą GloMax Discover System (Promega).

Iść do:
4.  Wyniki
4.1. Cytotoksyczność, skuteczna dawka i czas kontaktu

AgNPs wykazują cytotoksyczność wobec komórek ssaków poprzez wytwarzanie reaktywnych form tlenu (ROS) [8]. Chcieliśmy ocenić zależną od stężenia cytotoksyczność wykazywaną przez Ag na liniach komórkowych VeroE6/TMPRSS2 (pochodzenia innego niż ludzkie) i Calu-3 (komórka nabłonka płuc człowieka). cAg seryjnie rozcieńczano i dodawano do komórek w 96-studzienkowych płytkach, a żywotność komórek oceniano po 48 godzinach przy użyciu testu CellTiter-Glo. Stwierdzono, że Ag wykazuje cytotoksyczność w stężeniach od 20 części na milion (ppm) wzwyż zarówno w liniach komórkowych VeroE6/TMPRSS2 (ryc. 1 A), jak i Calu-3 (ryc. 1B).

Fig. 1

Cytotoksyczność srebra koloidalnego na komórkach ssaków 1A: Cytotoksyczność wykazywana przez seryjne stężenia srebra koloidalnego na komórkach VeroE6/TMPRSS2. 1B: Cytotoksyczność wykazywana przez seryjne stężenia srebra koloidalnego na komórkach Calu-3.

Ponieważ cAg zawiera cząstki o wielkości wahającej się od 1 do 1000 nm, użyliśmy go jako wstępnego przesiewu w celu ustalenia wpływu AgNPs na SARS-CoV-2. Wielokrotność infekcji (MOI) SARS-CoV-2 obliczono w niezależnych eksperymentach i stwierdzono, że wynosi ona 0,05 i 0,5 odpowiednio dla VeroE6/TMPRSS2 i Calu-3. Zawiesinę wirusa o ustalonym MOI traktowano każdym seryjnym rozcieńczeniem cAg przez 1 godz., a następnie inokulowano komórki VeroE6/TMPRSS2 i Calu-3. Żywotność komórek zakażonych VeroE6/TMPRSS2 oceniano po 48 godzinach w celu określenia odsetka komórek zabitych przez wirusa, a obciążenie wirusem oznaczano ilościowo w komórkach Calu-3 za pomocą ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkryptazą w czasie rzeczywistym (RT-qPCR) po 96 godzinach cAg wykazywał silne działanie przeciwwirusowe, co oznacza zwiększoną żywotność zakażonych komórek VeroE6/TMPRSS2 w stężeniach w zakresie od 1 do 10 ppm (ryc. 2 A). W komórkach Calu-3 zaobserwowano znaczne zmniejszenie obciążenia wirusem przy podobnym zakresie stężeń cAg (ryc. 2B). Chociaż jony metali są znanymi inhibitorami PCR w wysokich stężeniach, potwierdziliśmy, że w skutecznym stężeniu (2 ppm) Ag nie hamuje amplifikacji i jest odpowiedni do analizy RNA wirusa w próbkach zawierających Ag (ryc. S1) [9]. Ponieważ 2 ppm było również 10-krotnie niższe niż stężenie cytotoksyczne, wybrano je jako pożądane stężenie do dalszych testów.

Fig. 2

Stężenie i zależne od dawki działanie przeciwwirusowe nagich nanocząstek srebra na SARS-CoV-2.2A: srebro koloidalne ratuje komórki VeroE6/TMPRSS2 przed śmiercią komórkową za pośrednictwem SARS-CoV-2 w sposób zależny od stężenia. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,005 (∗∗∗). 2B: Zależne od stężenia hamowanie replikacji SARS-CoV-2 w komórkach Calu-3 przez srebro koloidalne. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,001 (∗∗∗). 2C: Nanocząstki srebra wykazują zależne od wielkości działanie przeciwwirusowe przeciwko SARS-CoV-2 w komórkach Vero/TMPRSS2. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,005 (∗∗∗). 2D: Zależne od wielkości hamowanie wirusa SARS-CoV-2 przez nanocząstki srebra w komórkach Calu-3. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,001 (∗∗∗).

Wcześniejsze badania dokumentowały zależną od wielkości siłę AgNPs w inaktywacji wirusów, przy czym stwierdzono, że wielkość cząstek ≤10 nm ma maksymalny efekt przeciwwirusowy [10]. Ponieważ cAg zawiera różne rozmiary cząstek Ag, przewidzieliśmy, że cząstki o wielkości około 10 nm w cAg wywarłyby działanie przeciwwirusowe. Aby to udowodnić, zastosowaliśmy test wstępnego traktowania wirusa (VPrA), aby przetestować działanie przeciwwirusowe AgNP o różnych rozmiarach w zakresie od 2 do 100 nm na wirusy zewnątrzkomórkowe. Wirus traktowano 2 ppm roztworem AgNP o różnych rozmiarach przez 1 godzinę, a mieszaninę wirusa-AgNP dodano do komórek VeroE6/TMPRSS2 i Calu-3. Żywotność komórek oznaczono ilościowo w teście CellTiter-Glo w VeroE6/TMPRSS2, a kopie wirusa w supernatancie oznaczono ilościowo przez RT-qPCR w komórkach Calu-3. Efekt przeciwwirusowy odnotowano dla AgNP o wielkości od 2 do 15 nm (ryc. 2C i D). AgNP2 wykazywał cytotoksyczność przy 2 ppm, podczas gdy inne rozmiary nie (ryc. S2). Dlatego do dalszych testów wybraliśmy PVP-AgNP10. Ponieważ zaobserwowaliśmy doskonałą aktywność przeciwwirusową w VPrA po 1 godzinie, chcieliśmy poznać minimalny czas kontaktu wymagany przez Ag do hamowania wirusa. Badanie przebiegu czasowego przeprowadzone na podstawie VPrA z PVP-AgNP10 ujawniło znaczne zahamowanie po 30 minutach kontaktu (ryc. S3).

4.2. Srebro hamuje wirusy zewnątrzkomórkowe, zapobiegając przedostawaniu się wirusa

Następnie przeprowadziliśmy VPrA, test po traktowaniu komórek (CPoA) i test przed traktowaniem komórek (CPrA) na SARS-CoV-2 przy użyciu PVP-AgNP10 w VeroE6/TMPRSS2, aby zaobserwować wpływ Ag na wirusy zewnątrzkomórkowe i wewnątrzkomórkowe ( Rys. 3 A). VPrA wykazał skuteczne hamowanie zewnątrzkomórkowych wolnych wirionów charakteryzujących się zarówno zmniejszeniem śmierci komórek, jak i gwałtownym spadkiem miana wirusa do znikomych poziomów (ryc. 3B i C). Następnie wykonaliśmy CPoA, aby wykryć zdolność Ag do tłumienia wirusa w już zakażonych komórkach. W tym projekcie eksperymentalnym komórki VeroE6/TMPRSS2 mogły być zakażone SARS-CoV-2 (MOI 0,05) przez 2 godziny, po czym wirusy zewnątrzkomórkowe zostały przemyte, a następnie zakażone komórki potraktowano 2 ppm PVP-AgNP10. Zaobserwowaliśmy znaczną ochronę zakażonych komórek i supresję obciążenia wirusem za pomocą PVP-AgNP10 (ryc. 3B i C). Dodatkowo wykonaliśmy CPrA, aby ocenić zdolność komórek poddanych wstępnej obróbce srebrem do odporności na infekcję wirusową. Komórki VeroE6/TMPRSS2 inkubowano z 2 ppm PVP-AgNP10 przez 3 godziny, po czym komórki przemyto w celu usunięcia niezwiązanego srebra, a następnie zakażono SARS-CoV-2 (MOI 0,05). Pod koniec 48 godzin wirus okazał się być tylko częściowo zahamowany (ryc. 3C).

Fig. 3

Nanocząstki srebra skutecznie hamują zewnątrzkomórkowy SARS-CoV-2.3A: Schematyczne przedstawienie testu wstępnego traktowania wirusa (panel górny), testu końcowego traktowania wirusa (panel centralny) i testu wstępnego traktowania komórek (panel dolny). 3B: Wydajność nanocząstek srebra 10 nm pokrytych PVP w trzech projektach badań w odniesieniu do ratowania komórek przed zakażeniem SARS-CoV-2. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,005 (∗∗∗). 2C: Wydajność nanocząstek srebra 10 nm pokrytych PVP w trzech projektach badań w odniesieniu do zmniejszenia replikacji SARS-CoV-2. Słupki błędów uzyskane z potrójnego testowania. wartość p ≤ 0,001 (∗∗∗).

Potwierdziliśmy zależne od wielkości działanie przeciwwirusowe PVP-AgNP10 za pomocą analizy immunofluorescencyjnej przeprowadzonej na modelu eksperymentalnym VPrA; Zakażenia SARS-CoV-2 skutecznie zapobiegał AgNP10, a nie AgNP100 (ryc. 4 A). Test łysinkowy wykazał, że srebro osiągnęło całkowite zahamowanie 0,05 MOI, co stanowi jeden log10 razy więcej niż kontrola wirusa. Częściowe hamowanie zaobserwowano przy wyższym obciążeniu wirusem, począwszy od 0,5 MOI (ryc. 4B). Aby ocenić rolę AgNPs we wnikaniu wirusa, przeprowadziliśmy test wnikania pseudowirusa oparty na lucyferazie. PVP-AgNP10 silnie hamował wejście pseudowirusa, charakteryzujący się znacznym zmniejszeniem aktywności lucyferazy, podobnym do przeciwciała neutralizującego stosowanego jako kontrola

(Fig. 4C).

Fig. 4

Charakterystyka nanocząstek srebra 10 nm pokrytych PVP w infekcji SARS-CoV-2. 4A: Obrazowanie immunofluorescencyjne porównujące wpływ 10 nm i 100 nm nanocząstek srebra na zakażenie SARS-CoV-2 w komórkach VeroE6/TMPRSS2. Jądra komórkowe (niebieski) i białko nukleokapsydu SARS-CoV-2 w cytoplazmie (czerwony). NC – Kontrola negatywna. 4B: Pokryte PVP 10 nm nanocząstki srebra chronią komórki VeroE6/TMPRSS2 przed śmiercią komórkową, w której pośredniczy infekcja SARS-CoV-2. Barwienie fioletem krystalicznym ujawnia częściową ochronę z widocznymi blaszkami (czerwone groty strzałek) i całkowitą ochronę bez blaszek (czarne groty strzałek). 4C: Test wejścia pseudowirusa. Pokryte PVP 10 nm nanocząsteczki srebra hamują wnikanie pseudowirusa do komórek VeroE6/TMPRSS2. NC – Kontrola negatywna, nAb – Przeciwciało neutralizujące. (W celu interpretacji odniesień do koloru w tej legendzie rysunku czytelnik jest kierowany do internetowej wersji tego artykułu.)

5.  Dyskusja

Ag jest od dawna znany ze swojego działania przeciwdrobnoustrojowego, a właściwości przeciwwirusowe AgNPs są intensywnie badane z ponownym zainteresowaniem w niedawnej przeszłości [1]. Dokładny mechanizm, za pomocą którego AgNPs wywierają działanie zabijające na wirusy, jest nadal niejasny. Jednak konsekwentnie zaobserwowano, że AgNPs oddziałują z białkami strukturalnymi na powierzchni wirusów zewnątrzkomórkowych, hamując infekcję we wczesnej fazie, albo poprzez zapobieganie przyłączaniu lub wnikaniu wirusa, albo przez uszkadzanie białek powierzchniowych w celu wpłynięcia na integralność strukturalną wirionów [ 11,12]. W obecnym badaniu uzyskaliśmy podobne wyniki w VPrA, gdzie AgNPs skutecznie hamują zewnątrzkomórkowe SARS-CoV-2, aby chronić komórki docelowe przed infekcją, a test wnikania pseudowirusa wykazał, że AgNPs zakłócają wnikanie wirusa.

Wykazano, że AgNPs preferencyjnie wiążą się z białkami powierzchniowymi wirusa bogatymi w grupy sulfhydrylowe i rozszczepiają wiązania dwusiarczkowe w celu destabilizacji białka, wpływając w ten sposób na infekcyjność wirusa [11,13]. Badania nad HIV wykazały, że AgNPs łączą się z wiązaniami dwusiarczkowymi, które znajdują się w bliskiej odległości od domeny wiążącej CD4 białka powierzchniowego gp120 [11]. Hati i Bhattacharyya wykazali znaczenie wiązań dwusiarczkowych w wiązaniu białka wypustkowego SARS-CoV-2 z receptorem enzymu konwertującego angiotensynę-2 (ACE2), którego przerwanie prowadzi do upośledzenia wiązania wirusa z receptorem [14]. Biorąc pod uwagę mechanizm działania AgNPs przedstawiony przez innych autorów, można przypuszczać, że AgNPs wywierają działanie przeciwwirusowe na SARS-CoV-2 poprzez rozrywanie wiązań dwusiarczkowych na białku wypustkowym i receptorach ACE2. Prowadzone są dalsze badania w celu znalezienia mechanizmu przeciwwirusowego AgNPs na SARS-CoV-2, a następnie jego szczegółowego wyjaśnienia.

Stwierdzono również, że AgNPs mają wewnątrzkomórkowe działanie przeciwwirusowe poprzez interakcję z wirusowymi kwasami nukleinowymi [15]. Zaobserwowaliśmy częściowe działanie przeciwwirusowe w CPrA, ponieważ nastąpiło pewne zmniejszenie miana wirusa w komórkach wstępnie traktowanych PVP-AgNP10. Chociaż przyczyna tego efektu nie jest obecnie znana, prawdopodobnie wyjaśnia się, że jest to spowodowane zniszczeniem mostków dwusiarczkowych na receptorze ACE2 lub prawdziwym mechanizmem wewnątrzkomórkowym (tam poprzez hamowanie seryjnej infekcji wirusowej nowo wytworzonego wirusa z zakażonych komórek do niezainfekowanych komórek). Ponadto, ponieważ Ag wiąże się niespecyficznie z białkami, ich zastosowanie jako środków przeciwwirusowych może również powodować pewne dysfunkcje komórkowe. Potrzebne są dalsze badania, aby dokładniej wyjaśnić holistyczne działanie Ag in vivo.

W kilku badaniach powtórzono zależne od wielkości działanie przeciwwirusowe AgNPs, przy czym najskuteczniejsze są cząstki o średnicy około 10 nm [1]. Przypisano to białku wirusowemu wyższą stabilność oddziaływania osiągniętą przez cząstki 10 nm, do czego nie są zdolne większe cząstki [11]. Zgodnie z tym zaobserwowaliśmy również aktywność anty-SARS-CoV-2 tylko dla AgNP o średnicach od 2 do 15 nm. Nasze badanie immunofluorescencji potwierdziło powyższe zjawisko, ponieważ zaobserwowaliśmy, że PVP-AgNP10 całkowicie hamował SARS-CoV-2, ale AgNP100 nie.

AgNPs mogą być generowane kilkoma metodami i mogą zawierać środki redukujące oraz środki blokujące wraz z cząsteczkami metali [16]. Stwierdzono, że powleczone lub zakryte AgNPs są korzystniejsze niż zwykłe AgNPs, ponieważ powłoka zwiększa stabilność, zmniejsza aglomerację i zmniejsza cytotoksyczność AgNPs [17]. Wśród powlekanych AgNPs nanocząstki pokryte PVP są szeroko badane pod kątem zastosowań biologicznych. Zaobserwowano, że powłoka PVP AgNPs nie utrudnia ich działania przeciwwirusowego, podczas gdy inne środki powlekające to robią [18]. Wykazano, że PVP-AgNP10 ma doskonałe działanie przeciwwirusowe przeciwko wirusom otoczkowym, takim jak RSV i HIV [11,19]. To było uzasadnienie wyboru PVP-AgNP10 do badania i wykazaliśmy silne działanie przeciwwirusowe PVP-AgNP10 przeciwko SARS-CoV-2.

Działanie przeciwwirusowe AgNPs jest również zależne od stężenia. W większości badań zaobserwowano skuteczność przeciwwirusową AgNPs w stężeniach od 10 do 100 ppm [1]. Jednak wykazano, że 0,5 ppm cAg jest skuteczne w hamowaniu wirusa grypy i jest to najmniejsze stężenie, o którym doniesiono, że wykazuje działanie przeciwwirusowe [20]. W bieżącym badaniu zaobserwowaliśmy, że nagie AgNP hamują SARS-CoV-2 w stężeniach w zakresie od 1 do 10 ppm i stają się cytotoksyczne dla komórek ssaków od 20 ppm i powyżej.

Cytotoksyczność AgNPs wobec komórek ssaków zależy od typu komórki, a także od typu AgNPs. Mehrbod i in. zaobserwowali cytotoksyczność w komórkach Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) z nagimi cząsteczkami cAg w stężeniach wyższych niż 0,5 ppm [20]. Stwierdzono, że nagie AgNPs z czynnikiem redukującym NaBH4 indukują apoptozę w komórkach gruczolakoraka okrężnicy przy 11 ppm, podczas gdy nagie AgNP stabilizowane cytrynianem wykazują cytotoksyczność w stężeniach wyższych niż 30 ppm [21,22]. W związku z tym wykazano, że AgNP powleczone PVP są najmniej cytotoksyczne bez wykazanej cytotoksyczności nawet przy 50 ppm w ludzkich komórkach nabłonka podstawnego pęcherzyków płucnych [19]. Mniejsze cząstki mają wyższy potencjał toksyczny ze względu na większą powierzchnię oddziaływania ze związanym białkiem [23]. Zaobserwowaliśmy ten efekt, ponieważ AgNP2 wykazywał cytotoksyczność nawet przy 2 ppm, podczas gdy żadna z większych cząstek nie była cytotoksyczna w tym stężeniu. Dlatego należy zachować ostrożność podczas stosowania Ag na powierzchniach biologicznych.

Jako lekarstwo na COVID-19 sprzedaje się różne preparaty do przyjmowania i inhalacji Ag, które można kupić bez recepty. Potencjał cytotoksyczny tych preparatów należy rozważyć przed użyciem osobistym. Ponadto Ag jest środkiem bakteriobójczym o bardzo szerokim spektrum działania. Nielegalne stosowanie Ag może spowodować brak równowagi w mikroflorze komensalnej, prowadząc do nieprzewidzianych konsekwencji [24]. AgNPs można stosować na różnych powierzchniach nieożywionych do zwalczania trwającej pandemii COVID-19 [3]. Stwierdzono, że maski powlekane Ag skutecznie hamują SARS-CoV-2 i potencjalnie mogą być skuteczne, gdy są stosowane na filtrach powietrza klimatyzatorów i urządzeń medycznych [25]. Udowodniono, że tkaniny polibawełniane z dodatkiem AgNP hamują SARS-CoV-2 [26]. Do dezynfekcji rąk i powierzchni nieożywionych stosuje się również środki odkażające i dezynfekujące na bazie Ag [27]. Nie jest jednak znany wpływ AgNPs na życie drobnoustrojów po uwolnieniu do środowiska [16]. Należy opracować odpowiedni protokół usuwania dla produktów zawierających Ag, aby uniknąć niepożądanego zakłócenia równowagi mikrobiologicznego środowiska w przypadku ich wyrzucenia po użyciu.

Iść do:
Oświadczenie o sprzecznym interesie

Autorzy nie mają konfliktu interesów bezpośrednio związanego z treścią tego artykułu. Y.Y. jest obecnym pracownikiem Kanto Chemical Co., Inc.

Iść do:
Podziękowanie

Badanie zostało sfinansowane przez Japońską Agencję Badań Medycznych i Rozwoju (AMED), numer grantu: 19fk0108110h0401 i 20he0522001j0001.

Iść do:
Przypisy

Załącznik ADane uzupełniające do tego artykułu można znaleźć w Internecie pod adresem

https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2020.09.018.

 

Dodatek A. (Dane uzupełniające)

Poniżej znajdują się dane uzupełniające do tego artykułu:

Komponent multimedialny 1:

Click here to view.(73K, docx)Multimedia component 1

 

Bibliografia
1. Galdiero S., Falanga A., Vitiello M., Cantisani M., Marra V., Galdiero M. Nanocząstki srebra jako potencjalne środki przeciwwirusowe. Mol. Bazylea Szwajcaria. 2011;16:8894–8918. [Bezpłatny artykuł PMC] [PubMed] [Google Scholar]
2. Han J., Chen L., Duan S.-M., Yang Q.-X., Yang M., Gao C., Zhang B.-Y., He H., Dong X.-P. Skuteczna i szybka inaktywacja koronawirusa SARS i innych drobnoustrojów narażonych na powierzchnie niektórych katalizatorów metalowych. Biomed. Otaczać. Nauka. BĄDZ S. 2005;18:176–180. [PubMed] [Google Scholar]
3. Talebian S., Wallace G.G., Schroeder A., ​​Stellacci F., Conde J. Środki dezynfekujące i czujniki oparte na nanotechnologii do SARS-CoV-2. Nat. Nanotechnologia. 2020; 15:618–621. [PubMed] [Google Scholar]
4. Matsuyama S., Nao N., Shirato K., Kawase M., Saito S., Takayama I., Nagata N., Sekizuka T., Katoh H., Kato F., Sakata M., Tahara M., Kutsuna S., Ohmagari N., Kuroda M., Suzuki T., Kageyama T., Takeda M. Wzmocniona izolacja SARS-CoV-2 przez komórki z ekspresją TMPRSS2. Proc. Natl. Acad. Nauka. USA 2020; 117:7001–7003. [Bezpłatny artykuł PMC] [PubMed] [Google Scholar]
5. Gordon DE, Jang GM, Bouhaddou M., Xu J., Obernier K., White KM, O’Meara MJ, Rezelj VV, Guo JZ, Swaney DL, Tummino TA, Hüttenhain R., Kaake RM, Richards AL, Tutuncuoglu B., Foussard H., Batra J., Haas K., Modak M., Kim M., Haas P., Polacco BJ, Braberg H., Fabius JM, Eckhardt M., Soucheray M., Bennett MJ, Cakir M., McGregor MJ, Li Q., ​​Meyer B., Roesch F., Vallet T., Mac Kain A., Miorin L., Moreno E., Naing ZZC, Zhou Y., Peng S., Shi Y., Zhang Z., Shen W., Kirby IT, Melnyk JE, Chorba JS, Lou K., Dai SA, Barrio-Hernandez I., Memon D., Hernandez-Armenta C., Lyu J., Mathy CJP, Perica T. , Pilla KB, Ganesan SJ, Saltzberg DJ, Rakesh R., Liu X., Rosenthal SB, Calviello L., Venkataramanan S., Liboy-Lugo J., Lin Y., Huang X.-P., Liu Y., Wankowicz SA, Bohn M., Safari M., Ugur FS, Koh C., Savar NS, Tran QD, Shengjuler D., Fletcher SJ, O’Neal MC, Cai Y., Chang JCJ, Broadhurst DJ, Klippsten S., Sharp PP, Wenzell NA, Kuzuoglu-Ozt urk D., Wang H.-Y., Trenker R., Young JM, Cavero DA, Hiatt J., Roth TL, Rathore U., Subramanian A., Noack J., Hubert M., Stroud RM, Frankel AD, Rosenberg OS, Verba KA, Agard DA, Ott M., Emerman M., Jura N., von Zastrow M., Verdin E., Ashworth A., Schwartz O., d’Enfert C., Mukherjee S., Jacobson M. ., Malik HS, Fujimori DG, Ideker T., Craik CS, Floor SN, Fraser JS, Gross JD, Sali A., Roth BL, Ruggero D., Taunton J., Kortemme T., Beltrao P., Vignuzzi M. , García-Sastre A., Shokat KM, Shoichet BK, Krogan NJ A Mapa interakcji białek SARS-CoV-2 ujawnia cele ponownego użycia leków. Natura. 2020;583:459–468.[Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Google Scholar]

6. Noah J.W., Severson W., Noah D.L., Rasmussen L., White E.L., Jonsson C.B. Komórkowy test luminescencji jest skuteczny w wysokoprzepustowych badaniach przesiewowych potencjalnych leków przeciwwirusowych na grypę. Antywir. Res. 2007;73:50–59. [PubMed] [Google Scholar]
7. Shirato K., Nao N., Katano H., Takayama I., Saito S., Kato F., Katoh H., Sakata M., Nakatsu Y., Mori Y., Kageyama T., Matsuyama S., Takeda M. Rozwój metod diagnostyki genetycznej do wykrywania nowego koronawirusa 2019(nCoV-2019) w Japonii. Jpn. J. Zainfekować. Dis. 2020;73:304–307. [PubMed] [Google Scholar]
8. Lanone S., Boczkowski J. Zastosowania biomedyczne i potencjalne zagrożenia zdrowotne nanomateriałów: mechanizmy molekularne. Aktualn. Mol. Med. 2006;6:651–663. [PubMed] [Google Scholar]
9. Combs L.G., Warren J.E., Huynh V., Castaneda J., Golden T.D., Roby R.K. Wpływ inhibitorów PCR jonów metali na wyniki uzyskane za pomocą zestawu Quantifiler(®) Human DNA Quantification Kit. Nauki kryminalistyczne. wewn. Genet. 2015;19:180–189. [PubMed] [Google Scholar]
10. Lara H.H., Ayala-Nuñez N.V., Ixtepan-Turrent L., Rodriguez-Padilla C. Tryb działania przeciwwirusowego nanocząstek srebra przeciwko HIV-1. J. Nanobiotechnol. 2010;8:1. [Bezpłatny artykuł PMC][PubMed] [Google Scholar]
11. Elechiguerra J.L., Burt J.L., Morones J.R., Camacho-Bragado A., Gao X., Lara H.H., Yacaman M.J. Interakcja nanocząstek srebra z HIV-1. J. Nanobiotechnol. 2005; 3:6. [Google Scholar]
12. Swathy J.R., Sankar M.U., Chaudhary A., Aigal S., Anshup null, Pradeep T. Antybakteryjne srebro: bezprecedensowy efekt anionowy. Nauka. Rep. 2014;4:7161. [Bezpłatny artykuł PMC] [PubMed] [Google Scholar]
13. Kim J., Yeom M., Lee T., Kim H.-O., Na W., Kang A., Lim J.-W., Park G., Park C., Song D., Haam S. Porowate nanocząstki złota do łagodzenia zakaźności wirusa grypy typu A. J. Nanobiotechnol. 2020;18 54. [artykuł PMC bezpłatny] [PubMed] [Google Scholar]
14. Hati S., Bhattacharyya S. Wpływ równowagi dwusiarczku tiolu na wiązanie białka kolca Covid-19 z receptorem enzymu konwertującego angiotensynę 2. ACS Omega. 2020;5:16292–16298.[artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Google Scholar]
15. Lu L., Sun R.W.-Y., Chen R., Hui C.-K., Ho C.-M., Luk J.M., Lau G.K.K., Che C.-M. Nanocząsteczki srebra hamują replikację wirusa zapalenia wątroby typu B. Antywir. Tam. 2008;13:253–262. [PubMed] [Google Scholar]
16. Wei L., Lu J., Xu H., Patel A., Chen Z.-S., Chen G. Nanocząstki srebra: synteza, właściwości i zastosowania terapeutyczne, Drug Discov. Dziś wolne. 2015;20:595–601. [Bezpłatny artykuł PMC][PubMed] [Google Scholar]
17. Fahmy H.M., Mosleh A.M., Elghany A.A., Shams-Eldin E., Serea E.S.A., Ali SA, Shalan A.E. Powlekane nanocząstki srebra: synteza, cytotoksyczność i właściwości optyczne. RSC Adv. 2019;9[Google Scholar]
18. Zheng Y., Cloutier P., Hunting D.J., Sanche L. Radiosensitization przez nanocząstki złota: porównanie uszkodzeń DNA indukowanych przez elektrony o niskiej i wysokiej energii. J. Biomed. Nanotechnologia. 2008;4:469-475. [Google Scholar]
19. Morris D., Ansar M., Speshock J., Ivanciuc T., Qu Y., Casola A., Garofalo R. Aktywność przeciwwirusowa i immunomodulacyjna nanocząstek srebra w doświadczalnej infekcji RSV. Wirusy. 2019;11 [bezpłatny artykuł PMC] [PubMed] [Google Scholar]
20. Mehrbod P., Motamed N., Tabatabaian M., Estyar R.S., Amini E., Shahidi M., Kheiri M.T. Działanie przeciwwirusowe in vitro „nanosrebra” na wirusa grypy. DARU J. Pharm. Nauka. 2015;17:88-93.[Google Scholar]
21. Gopinath P., Gogoi SK, Chattopadhyay A., Ghosh S.S. Implikacje apoptozy komórek indukowanej nanocząsteczkami srebra w terapii genowej in vitro. Nanotechnologia. 2008;19 [PubMed] [Google Scholar]

22. Bekele A.Z., Gokulan K., Williams K.M., Khare S. Dose i zależne od wielkości działanie przeciwwirusowe nanocząstek srebra na kociego kaliciwirusa, surogat ludzkiego Norowirusa. Żywnośćb. Patog. Dis. 2016;13:239–244. [PubMed] [Google Scholar]
23. Johnston H.J., Hutchison G., Christensen F.M., Peters S., Hankin S., Stone V. Przegląd toksyczności in vivo i in vitro cząstek srebra i złota: cechy cząstek i mechanizmy biologiczne odpowiedzialne za obserwowaną toksyczność. Kryt. Wielebny Toksykol. 2010;40:328–346. [PubMed] [Google Scholar]
24. Williams K., Milner J., Boudreau MD, Gokulan K., Cerniglia C.E., Khare S. Wpływ podprzewlekłej ekspozycji nanocząstek srebra na mikrobiotę jelitową i związane z jelitami odpowiedzi immunologiczne w jelicie krętym szczurów Sprague-Dawley. Nanotoksykologia. 2015;9:279–289. [PubMed] [Google Scholar]
25. Balagna C., Perero S., Percivalle E., Nepita E.V., Ferraris M. Działanie wirusobójcze na koronawirusa SARS-CoV-2 napylonej powłoki kompozytowej nanoklaster srebra/krzemionka. Otwórz Ceram. 2020; 1:100006. [Google Scholar]
26. Tremiliosi GC, Simoes LGP, Minozzi DT, Santos RI, Vilela DCB, Durigon EL, Machado RRG, Medina DS, Ribeiro LK, Rosa ILV, Assis M., Andrés J., Longo E., Freitas-Junior LH Ag nanocząstki antybakteryjne tkaniny polibawełniane, zapobiegające przenoszeniu i rozprzestrzenianiu się SARS-CoV-2. BioRxiv. 2020:2020. 06.26.152520. [Google Scholar]
27. Vazquez-Munoz R., Lopez-Ribot J.L. Nanotechnologia jako alternatywa dla ograniczenia rozprzestrzeniania się COVID-19. Wyzwania. 2020;11:15. []


https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7486059/

CZERWONE

Witryna wykorzystuje Akismet, aby ograniczyć spam. Dowiedz się więcej jak przetwarzane są dane komentarzy.

ODBLOKUJ TREŚCI I STREAM KLIKAJĄC W PONIŻSZY OBRAZEK PEŁNA INSTRUKCJA  + MATERIAŁ FILMOWY !! 

Holler Box
%d bloggers like this: